（本試劑僅用于科研、實驗、技術支持，不直接用于臨床診斷） 【簡介】 用于全自動法測定糖化白蛋白含量。 糖化蛋白半衰期較短，測定糖化白蛋白濃度可有效反映患者過去1-3周內平均血糖的水平，并不受臨時血糖濃度波動的影響，為臨床糖尿病人的診斷和較長時間血糖控制水平的研究，提供一個很好的指標。 【測定方法】 氧化酶法 【測定原理】 樣本中糖化白蛋白在被特異性的蛋白酶裂解釋放出糖化氨基酸，經氧化酶氧化后產生過氧化氫，過氧化氫經Trinder’S系統顯色后其顏色深淺與糖化血清白蛋白含量成正比，與標準比較后可求得糖化白蛋白含量。 【試劑盒組成】 | 規 格 | 組 份 | 濃 度 | 試劑 | 液體雙試劑 試劑I: 試劑II=4:1 | GOOD’S緩沖液、蛋白酶、氧化酶、4-AAP、TOOS | 適量 | GA校準品 | 凍干1ml | 糖化白蛋白、穩定劑 | 見標簽 | GA質控品 | 凍干1ml | 糖化白蛋白、穩定劑 | 見標簽 |
【樣本要求】 血清、血漿（EDTA、肝素、檸檬酸）以及血糖用血漿（2種混合：NaF+肝素，NaF+EDTA; 3種混合：NaF+肝素+EDTA）。樣本采集后，應盡快分離血清或血漿。樣本置于2~8℃可穩定14天，-20℃可穩定5周。 【測定步驟】 1.本試劑為液體雙試劑，可直接使用。 2.測定參數：波長：546nm；光徑：10mm；溫度：37℃。 3.測定方法： 加入物 | 測定管（U） | 標準管（S） | 空白管（B） | R1 （μl） | 200 | 200 | 200 | 標本 （μl） | 5 | - | - | 標準液（μl） | - | 5 | - | 蒸餾水（μl） | - | - | 5 | 混勻，置37℃孵育3-5分鐘，讀取各管吸光度A1 | R2（μl） | 50 | 50 | 50 | 混勻，置37℃繼續反應5min，讀取各管吸光度A2，計算ΔA=A2-A1 |
4.上機參數： 程序： | 終點法 | 血清+R1反應時間： | 3~5min | 標本 | 5μl | 主波長： | 546nm | 血清+R1+R2反應時間： | 5min | R1 | 200μl | 輔助波長： | 660nm | 反應溫度： | 37℃ | R2 | 50μl |
5.計算： 糖化白蛋白含量（μmol/L） = [（A標本-A空白）/ （A校準-A空白）] × 校準值 【性能指標】 1、 空白吸光度 ≤ 0.100； 2、 線性范圍0.3-53.2 g/L （5-800μmol/L）； 3、 批內/分析內精密度 CV≤5％；批間相對極差 ≤7％； 4、 準確性 相對偏差不超過±10％。 5、 抗干擾性 血清膽紅素<29 mg/dL、TG<750mg/dL、血紅蛋白<200 mg/dL、膽汁酸<8 mg/dL、尿酸<33mg/dL、葡萄糖<1800 mg/dL時，對測定無顯著影響。 6、方法對照 本試劑盒檢測方法與色譜法進行相關性比較試驗，結果如下：Y=1.0122X+0.3123，r=0.9902，n=100，Y為本法試劑，X為色譜法。 【注意事項】 1、試劑變混濁或空白吸光度值＞0.100時，將不能使用，應棄去； 2、建議各實驗室建立自己的正常值范圍； 3、試劑與樣本量可根據需要按比例調節； 4、請勿用嘴直接吸取試劑，避免接觸皮膚、眼睛及粘膜，一旦接觸，應即用水沖洗污染部位； 5、使用配套的校準品校準，校準周期為30天，更換試劑批號時需要重新校準。建議使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控，測定的控制值應在確定的限制范圍內，若控制值失控，實驗室應采取適當的糾正措施。 6、當標本濃度超過檢測范圍時，應用生理鹽水稀釋標本后再進行檢測，標本值為測定值乘以稀釋倍數。 【參考范圍】 正常人血清 糖化白蛋白（GA）: 3.70-7.64 g/L （56-115μmol/L）; 或 糖化白蛋白/白蛋白（ GA/ALB）: 11.00~16.00%。 建議各實驗室制定自己的參考范圍。 【儲存條件與有效期】 未開封的試劑在2-8℃避光條件下可穩定14個月。 試劑開封后，存放在分析儀試劑倉中(2-8℃)的試劑在30天內性質穩定。 【參考文獻】 1、Kazuyoshi Ikeda, etal, Clinical Chemistry, 1988, 44:256-263. 2、King H, etal, Diabetes Care, 1988, 21:1414-1431. |
