(本試劑僅用于科研、實驗、技術支持,不直接用于臨床診斷) 【簡介】 用于全自動法測定糖化白蛋白含量。 糖化蛋白半衰期較短,測定糖化白蛋白濃度可有效反映患者過去1-3周內平均血糖的水平,并不受臨時血糖濃度波動的影響,為臨床糖尿病人的診斷和較長時間血糖控制水平的研究,提供一個很好的指標。 【測定方法】 氧化酶法 【測定原理】 樣本中糖化白蛋白在被特異性的蛋白酶裂解釋放出糖化氨基酸,經氧化酶氧化后產生過氧化氫,過氧化氫經Trinder’S系統顯色后其顏色深淺與糖化血清白蛋白含量成正比,與標準比較后可求得糖化白蛋白含量。 【試劑盒組成】 | 規 格 | 組 份 | 濃 度 | 試劑 | 液體雙試劑 試劑I: 試劑II=4:1 | GOOD’S緩沖液、蛋白酶、氧化酶、4-AAP、TOOS | 適量 | GA校準品 | 凍干1ml | 糖化白蛋白、穩定劑 | 見標簽 | GA質控品 | 凍干1ml | 糖化白蛋白、穩定劑 | 見標簽 |
【樣本要求】 血清、血漿(EDTA、肝素、檸檬酸)以及血糖用血漿(2種混合:NaF+肝素,NaF+EDTA; 3種混合:NaF+肝素+EDTA)。樣本采集后,應盡快分離血清或血漿。樣本置于2~8℃可穩定14天,-20℃可穩定5周。 【測定步驟】 1.本試劑為液體雙試劑,可直接使用。 2.測定參數:波長:546nm;光徑:10mm;溫度:37℃。 3.測定方法: 加入物 | 測定管(U) | 標準管(S) | 空白管(B) | R1 (μl) | 200 | 200 | 200 | 標本 (μl) | 5 | - | - | 標準液(μl) | - | 5 | - | 蒸餾水(μl) | - | - | 5 | 混勻,置37℃孵育3-5分鐘,讀取各管吸光度A1 | R2(μl) | 50 | 50 | 50 | 混勻,置37℃繼續反應5min,讀取各管吸光度A2,計算ΔA=A2-A1 |
4.上機參數: 程序: | 終點法 | 血清+R1反應時間: | 3~5min | 標本 | 5μl | 主波長: | 546nm | 血清+R1+R2反應時間: | 5min | R1 | 200μl | 輔助波長: | 660nm | 反應溫度: | 37℃ | R2 | 50μl |
5.計算: 糖化白蛋白含量(μmol/L) = [(A標本-A空白)/ (A校準-A空白)] × 校準值 【性能指標】 1、 空白吸光度 ≤ 0.100; 2、 線性范圍0.3-53.2 g/L (5-800μmol/L); 3、 批內/分析內精密度 CV≤5%;批間相對極差 ≤7%; 4、 準確性 相對偏差不超過±10%。 5、 抗干擾性 血清膽紅素<29 mg/dL、TG<750mg/dL、血紅蛋白<200 mg/dL、膽汁酸<8 mg/dL、尿酸<33mg/dL、葡萄糖<1800 mg/dL時,對測定無顯著影響。 6、方法對照 本試劑盒檢測方法與色譜法進行相關性比較試驗,結果如下:Y=1.0122X+0.3123,r=0.9902,n=100,Y為本法試劑,X為色譜法。 【注意事項】 1、試劑變混濁或空白吸光度值>0.100時,將不能使用,應棄去; 2、建議各實驗室建立自己的正常值范圍; 3、試劑與樣本量可根據需要按比例調節; 4、請勿用嘴直接吸取試劑,避免接觸皮膚、眼睛及粘膜,一旦接觸,應即用水沖洗污染部位; 5、使用配套的校準品校準,校準周期為30天,更換試劑批號時需要重新校準。建議使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控,測定的控制值應在確定的限制范圍內,若控制值失控,實驗室應采取適當的糾正措施。 6、當標本濃度超過檢測范圍時,應用生理鹽水稀釋標本后再進行檢測,標本值為測定值乘以稀釋倍數。 【參考范圍】 正常人血清 糖化白蛋白(GA): 3.70-7.64 g/L (56-115μmol/L); 或 糖化白蛋白/白蛋白( GA/ALB): 11.00~16.00%。 建議各實驗室制定自己的參考范圍。 【儲存條件與有效期】 未開封的試劑在2-8℃避光條件下可穩定14個月。 試劑開封后,存放在分析儀試劑倉中(2-8℃)的試劑在30天內性質穩定。 【參考文獻】 1、Kazuyoshi Ikeda, etal, Clinical Chemistry, 1988, 44:256-263. 2、King H, etal, Diabetes Care, 1988, 21:1414-1431. |